تعیین میزان وقوع باکتری اشریشیا کولایO157:H7 در گاوداری‌های شیری صنعتی شیراز به روش IMS و M-PCR

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

چکیده

به منظور تشخیص مخازن اشریشیا کولای O157 تولید کننده توکسین شیگا، روش‌های جداسازی و تشخیصی حساس مورد نیاز می‌باشد. حساسیت روش‌های متداول کشت را با استفاده از روش‌های ایمنولوژیک تغلیظی به طور معنی‌داری می‌توان افزایش داد و نتایج منفی کاذب کمتری به دست آورد. در مطالعه حاضر روش غنی‌سازی و جداسازی ایمنو مگنتیک (IMS) همراه با آزمایش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز چندگانه (M-PCR) به منظور تشخیص ژن‌های hlyeaestx2 و stx1 مورد مقایسه قرار گرفتند. در این مطالعه تعداد 975 نمونه مدفوع از 26 گاوداری شیری صنعتی اطراف شیراز اخذ گردید. نمونه‌های اخذ شده در محیط کشت برات تریپتوز سویا برات تغییر یافته(m-TSB)  و در دمای °C37 به مدت 18 تا 24 ساعت غنی‌سازی شدند. نمونه‌های غنی‌سازی شده به صورت 5 تایی با هم مخلوط شده و با دو روشPCR  و IMS مورد آزمایش قرار گرفتند. در ارزیابی حساسیت روش        M-PCR به کار رفته، حداقل تعداد باکتری اشریشیا کولای O157:H7 در واکنش مثبت، CFU 102 × 23/1 در میلی‌لیتر      m-TSB بدون حضور مدفوع و CFU 106 × 23/1 در میلی‌لیتر مدفوع غنی شده در m-TSB به دست آمد. در PCR نمونه‌های غنی شده هیچ مورد مثبتی شناسایی نشد اما در روش IMS یک نمونه مثبت تشخیص داده شد و با روش M-PCR صحت آن تایید گردید. میزان وقوع این باکتری در مدفوع گاوهای شیری گاوداری‌های شیراز برابر 51/0% و میزان وقوع گله‌ای این باکتری 86/3% به دست آمد. جداسازی این سروتیپ از نمونه‌های مدفوع نشان می‌دهد که گاو مخزن این پاتوژن است و می‌تواند منشا عفونت برای انسان واقع شود. این یافته دارای اهمیت قابل توجهی از دیدگاه بهداشت عمومی می‌باشد

کلیدواژه‌ها