شناسایی باکتری اشریشیا کلی O157:H7 تولید کننده شیگاتوکسین در نمونه‌های شیر خام گاوداری‌های اطراف مشهد به روش PCR چندگانه

نوع مقاله : مقاله کوتاه

نویسندگان

چکیده

در این بررسی، در طول ماه‌های تابستان به صورت تصادفی 130 نمونه شیر خام از تانکرهای شیر که به کارخانه شیر پگاه تحویل داده می‌شد نمونه‌گیری گردید. جهت جداسازی باکتری اشریشیا کلی O157:H7 نمونه‌ها ابتدا در محیط آبگوشت تریپتیک سوی حاوی نووبیوسین غنی‌سازی گردید و سپس در محیط آگار انتخابی CT-SMAC حاوی سیفیکسیم و تلوریت پتاسیم کشت داده شد. کلنی‌های غیر تخمیر کننده سوربیتول (NSF) با استفاده از آزمایش‌های بیوشیمیایی (IMViC) به عنوان اشریشیا کلی مورد تایید قرار گرفتند، سپس به روش PCR چندگانه (m-PCR) و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن کد کننده آنتی‌ژنهای O157 و H7 و پس از آن پرایمرهای اختصاصی ژن‌های stx1 و stx2 مورد آزمایش قرار گرفتند. در این مطالعه 8 نمونه کلنی‌های اشریشیا کلی NSF جداسازی گردید. در آزمایش m-PCR یک (77/0%) نمونه آلوده به سروتیپ O157:H7 تشخیص داده شد و در آزمایش m-PCR دوم مشخص گردید که باکتری جداسازی شده حاوی ژن stx2 می‌باشد. روش مورد استفاده می‌تواند به عنوان روش جایگزین روش‌های ایمونولوژیک که حضور آنتی‌ژنهای سوماتیک و تاژک را مورد شناسایی قرار می‌دهند مطرح باشد و علاوه بر آن توان توکسین زائی آن‌ها را نیز مشخص می‌نماید.

کلیدواژه‌ها