شناسایی گونه‌های مایکوباکتری‌های غیر عوامل سلی با استفاده از آنالیز PCR-RFLP در مایعات حاصل از شستشوی نای در گاوها و بوفالوهای دچار دیسترس تنفسی

نوع مقاله : مقاله کوتاه

نویسندگان

چکیده

پیشینه: سل گاوی (bTB) یک بیماری مزمن در گاوها و با اهمیت اقتصادی بالا در دامپروری است که توسط مایکوباکتریوم بوویس ایجاد می‌شود و دارای قابلیت انتقال به انسان به عنوان بیماری مشترک بین انسان و دام، می‌باشد. تعدادی مایکوباکتری‌های غیر عوامل سلی (NTM) هستند که بیماری مشابه با bTB ایجاد می‌کنند و سبب اختلال در تشخیص bTB می‌شوند. مایکوباکتری‌های غیر عوامل سلی ذاتا ساپروفیت هستند، اما برخی از آن‌ها ممکن است که سبب عفونت‌های ریوی، ورم پستان، جراحات در مجاری تنفسی و گره‌های لنفاوی گاوها شوند؛ از اینرو در سراسر جهان شناخته شده بوده و سبب اختلال در تشخیص bTB می‌شوند. هدف: هدف از این مطالعه شناسایی گونه‌های NTM از گاوها و بوفالوهای دچار دیسترس تنفسی با استفاده از روش‌های بیوشیمیایی و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز-تحلیل چند شکلی طولی قطعات برش یافته (PCR-RFLP) (PRA) بود. روش کار: در مجموع 50 نمونه حاصل از شستشوی نایی 41 راس گاو و 9 راس بوفالوی دچار دیسترس تنفسی، جمع آوری شد. نمونه‌ها پس از آلودگی‌زدایی مناسب با NaOH 4% به محیط میدل بروک 7H10 تلقیح شدند. جدایه‌های به دست آمده با آزمون‌های بیوشیمیایی شناسایی شدند. DNA های استخراج شده از نمونه‌ها و جدایه‌ها با روش PRA که شامل تکثیر ژن hsp65 (bp 439) و تحلیل RFLP محصول تکثیر شده بود، مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج: از 50 نمونه حاصل از شستشوی نای، تنها یک جدایه از مایکوباکتریوم کانساسی (1 عدد) (2%) به دست آمد که با آزمون‌های بیوشیمیایی و PRA تایید شد. مایکوباکتریوم کانساسی (4 عدد) (8%)، مایکوباکتریوم اینتراسلولار (1 عدد) (2%)، و مایکوباکتریوم واکا (1 عدد) (2%) با روش PRA شناسایی شدند. نتیجه‌گیری: این مطالعه به اهمیت NTB در حیوانات تاکید دارد. واکنش زنجیره‌ای پلیمراز-تحلیل چند شکلی طولی قطعات برش یافته، روشی مطمئن‌تر و سریع‌تر برای شناسایی NTB نسبت به روش‌های رایج است.

کلیدواژه‌ها


Chang, CL; Kim, HH; Son, HC; Park, SS; Lee, MK; Park, SK; Park, WW and Jeon, CH (2001). False-positive growth of Mycobacterium tuberculosis attributable to laboratory contamination confirmed by restriction fragment length polymorphism analysis. Int. J. Tuberc. Lung Dis., 5: 861-867.
Cho, CH; Han, SH; Chin, BS; Choi, SH; Lee, HS; Kim, CO; Kim, MS; Choi, JY; Song, YG and Kim, JM (2009). Diagnosis and species identification of mycobacterial infections by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism analysis of sterile body fluids. Korean J. Intern. Med., 24: 135-138.
Covert, TC; Rodgers, MR; Reyes, AL and Stelma, GNJr (1999). Occurrence of non-tuberculosis-like mycobacteria in environmental samples. Appl. Environ. Microbiol., 65: 2492-2496.
Gcebe, N and Hlokwe, TM (2017). Nontuberculous mycobacteria in South African wildlife: neglected pathogens and potential impediments for bovine tuberculosis diagnosis. Front. Cell Infect. Microbiol., 1: 74-84.
Gopinath, K and Singh, S (2010). Non-tuberculosis-like mycobacteria in TB endemic countries: are we neglecting the danger? PLOS Negl. Trop. Dis., 4: e615.
Honda, JR; Virdi, R and Chan, ED (2018). Global environmental nontuberculous mycobacteria and their contemporaneous man-made and natural niches. Front. Microbiol., 9(2029).
Johnson, MM and Odell, JA (2014). Non-tuberculous mycobacterial pulmonary infections. J. Thorac. Dis., 6: 210-220.
Kankya, C; Muwonge, A; Djonne, B; Munyeme, M; Opuda-Asibo, J; Skjerve, E; Oloya, J; Edvardsen, V and Johansen, TB (2011). Isolation of non-tuberculous mycobacteria from pastoral ecosystems of Uganda: public health significance. BMC Public Health. 11(320).
Nour-Neamatollahie, A; Ebrahimzadeh, N; Siadat, SD; Vaziri, F; Eslam, M; Sepahi, AA; Khanipour, S; Masoumi, M; Sakhaee, F; Jajin, MZ; Bahrmand, A and Fateh, A (2017). Distribution of non-tuberculosis mycobacteria strains from suspected tuberculosis patients by heat shock protein 65 PCR-RFLP. Saudi J. Biol. Sci., 24: 1380-1386.
Porvaznik, I; Solovic, I and Mokry, J (2017). Non-tuberculous mycobacteria: classification, diagnostics and therapy. Adv. Exp. Med. Biol., 944: 19-25.
Schinnick, T (1987). The 65-kilodalton antigen of Mycobactenium tuberculosis. J. Bacteriol., 169: 1080-1088.
Sharma, AK; Randhawa, CS; Narang, A; Sood, NK and Rai, TS (2017). Cytological and bacteriological evaluation of tracheal aspirates for the diagnosis of lung affections in horses. J. Anim. Res., 7: 459-464.
Telenti, A; Marchesi, F; Balz, M; Bally, F; Bottger, EC and Bodmer, T (1993). Rapid identification of mycobacteria to the species level by polymerase chain reaction and restriction enzyme analysis. J. Clin. Microbiol., 31: 175-178.
Tortoli, E (2006). The new mycobacteria: an update. FEMS Immunol. Med. Microbiol., 48: 159-178.
Waters, WR; Whelan, AO; Lyashchenko, KP; Greenwald, R; Palmer, MV and Harris, NB (2010). Immune responses in cattle inoculated with Mycobacterium bovis, Mycobacterium tuberculosis or Mycobacterium kansasii. Clin. Vaccine Immunol., PP: 247-252.
Whittington, RJ and Sergeant, ES (2001). Progress towards understanding the spread, detection and control of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in animal populations. Aust. Vet. J., 79: 267-278.