تاثیر لقاح مصنوعی با استفاده از منی منجمد و تازه روی قابلیت تکامل و حفاظت فراسرد در رویان‌های بوفالو

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

چکیده

تولید رویان‌هایی با کیفیت بالا در شرایط آزمایشگاهی، نیازمند یک لقاح مصنوعی (IVF) کارآمد است. منشا منی یکی از فاکتورهای مهم است که در موفقیت تولید جنین در شرایط آزمایشگاهی اثر دارد. بنابراین هدف ما از انجام این آزمایش، مشخص کردن اثر استفاده از منی منجمد و تازه در لقاح مصنوعی، بر قابلیت تکوین و حفاظت فراسرد جنین‌های بوفالو بود. تخمک‌های بوفالو پس از بالغ سازی با استفاده از منی منجمد یا تازه در شرایط آزمایشگاهی بارور شدند. پس از ارزیابی رویان‌ها، مرولا و بلاستوسیت‌های با کیفیت با استفاده از پایوت‌های 25/0 میلی‌لیتری منجد شده و قابلیت زنده مانی آن‌ها پس از ذوب، به وسیله کشت به مدت 24 ساعت مورد بررسی قرار گرفت. تفاوت معنی‌داری در سرعت تقسیم، بین رویان‌های حاصل از منی‌های منجمد و تازه مشاهده نشد ولی سرعت تکامل رویان‌ها به مراحل مرولا (P<0.05) و بلاستوسیت (P<0.01) به طور معنی‌داری در رویان‌های حاصل از منی منجمد در مقایسه با منی تازه کاهش یافت. پس از گرم کردن رویان‌های منجمد، هیچ گونه تفاوت معنی‌داری در درصد رویان‌هایی که از نظر مرفولوژی زنده بودند بین رویان‌های حاصل از منی منجمد و تازه مشاهده نشد. اما پس از 24 ساعت کشت، نرخ جنین‌های دارای مرفولوژی طبیعی و زنده مانده در رویان‌های حاصل از منی تازه در مقایسه با منی منجمد افزایش یافت (P<0.05). به عنوان نتیجه‌گیری می‌توان بیان کرد که استفاده از منی تازه در مقایسه با منی منجمد، می‌تواند سبب بهبود قابلیت تکامل و حفاظت فراسرد رویان‌ها در بوفالو شود.

کلیدواژه‌ها


Abdel Dayem, AMH; Mahmoud, KGhM; Nawito, MF; Ayoub, MM and Scholkamy, TH (2009). Fertility evaluation in Egyptian buffalo bulls using zonapellucida binding and in vitro fertilization assays. Livest. Sci., 122: 193-198.
Abd El-Fatah, EM; El-Behairy, AM; Amin, AS and Eltablawy, NA (2008). Effect of cryopreservation on DNA integrity, lipid peroxidation and antioxidation enzyme activity in buffalo spermatozoa. Egypt. J. Basic Appl. Physiol., 7: 467-481.
Brackett, BG and Oliphant, G (1975). Capacitation of rabbit spermatozoa in vitro. Biol. Reprod., 12: 260-274.
Edgar, DH; Bourne, H; Speirs, AL and McBain, JC (2000). A quantitative analysis of the impact of cryopreservation on the implantation potential of human early cleavage stage embryos. Hum. Reprod., 15: 175-179.
El-Naby, AlAlHH; Mahmoud, KGhM; Scholkamy, TH; Sosa, GAM; Ahmed, YF and Abouel-Roos, MEA (2016). Influence of epidermal growth factor with cysteamine on in-vitro buffalo embryo development. Egypt. J. Vet. Sci., 47: 27-39.
El-Naby, AlAlHH; Mahmoud, KGhM; Sosa, GAM; Abouel-Roos, MEA and Ahmed, YF (2017). Effect of using ascorbic acid and cysteamine supplementation on in-vitro development of buffalo embryos. Asian Pacific J. Reprod., 6: 85-88.
El-Sisy, GA; ElNatat, WS and El-Sheshtawy, RI (2007). Buffalo semen quality, antioxidants and peroxidation during chilling and cryopreservation. Online J. Vet. Res., 11: 55-61.
Englert, Y; Delvigne, A; Vekemans, M; Lejeune, B; Henlisz, A; De Maertelaer, G and Leroy, F (1989). Should one use fresh or frozen sperm in in-vitro fertilization with donors? Acta Urol Belg., 57: 83-91.
Gasparrini, B (2002). In vitro embryo production in buffalo species: state of the art. Theriogenology. 57: 237-256.
Gordon, I (1996). Controlled reproduction in farm animals series: controlled reproduction in cattle and buffaloes. CAB International, UK.
Janny, L and Ménézo, YJ (1994). Evidence for a strong paternal effect on human preimplantation embryo development and blastocyst formation. Mol. Reprod. Dev., 38: 36-42.
Januskauskas, A and Žilinskas, H (2002). Bull semen evaluation post-thaw and relation of semen characteristics to bull’s fertility. Vet. Zootec., 17: 29-36.
Lehloenya, KC; Mahoete, N; Greyling, JPC and Nedambale, TL (2010). Effect of breed and frozen-thawed ram semen on in vitro fertilization and ovine embryonic development. Reprod. Fertil. Dev., 23: 170.
Mahmoud, KGhM (2010). Vitrification of oocytes and embryos for conservation of animal genetic resources. Twenty-Two Annual Congress Egyptian Society. Animal Reproduction Fert. Cairo and RasSedr, 13-17 February. PP: 75-114.
Mahmoud, KGhM; El-Sokary, AAE; Abdel-Ghaffar, AE; Abou El-Roos, MEA and Ahmed, YF (2015a). Analysis of chromatin integrity and DNA damage in cryopreserved buffalo semen. Iran. J. Vet. Res., 16: 161-166.
Mahmoud, KGhM; El-Sokary, AAE; Abou El-Roos, MEA; Abdel-Ghaffar, AE and Nawito, M (2013). Sperm characteristics in cryopreserved buffalo bull semen in relation to field fertility. Iran. J. Appl. Anim. Sci., 3: 777-783.
Mahmoud, KGhM; El-Sokary, MMM; Kandiel, MMM; Abouel-Roos, MEA and Sosa, GMS (2016). Effect of
cysteamine during in vitro maturation on viability and meiotic competence of vitrified buffalo oocytes. Iran. J. Vet. Res., 17: 165-170.
Mahmoud, KGhM and Nawito, MF (2005). Influence of serum source on buffalo in vitro embryonic development with reference to heat inactivation. Livest. Prod. Sci., 96: 285-289.
Mahmoud, KGhM; Scholkamy, TH and Darwish, SF (2015b). Improvement of vitrification of in vitro produced buffalo embryos with a special reference to sex ratio following vitrification. Iran. J. Vet. Res., 16: 325-330.
Mahmoud, KGhM and Seidel, JrGE (2010). Viability and DNA fragmentation assessment of bovine embryos vitrified by different methods. Researcher. 2: 14-20.
Mahmoud, KGhM; Ziada Maha, S and Scholkamy, TH (2004). Freezability of buffalo semen in relation to its in-vitro fertilizing capacity and chromosomal picture. J. Egypt. Vet. Med. Assoc., 64: 239-251.
Mukhopadhyay, CS; Gupta, AK; Yadav, BR; Chauhan, IS; Gupta, A; Mohanty, TK and Raina, VS (2011). Effect of cryopreservation on sperm chromatin integrity and fertilizing potential in bovine semen. Livest. Sci., 136: 114-121.
Niwa, K and Ohgoda, O (1988). Synergistic effect of caffeine and heparin on in vitro fertilization of cattle oocytes matured in culture. Theriogenology. 30: 733-741.
Pugh, PA; Fukui, Y; Tervit, HR and Thompson, JG (1991). Developmental ability of in vitro matured sheep oocytes collected during the nonbreeding season and fertilized in vitro with frozen ram semen. Theriogenology. 36: 771-778.
Romao, R; Marques, CC; Baptista, MC; Vasques, MI; Barbas, JP; Horta, AEM; Carolino, N; Bettencourt, E; Plancha, C; Rodrigues, P and Pereira, RM (2013). Evaluation of two methods of in vitro production of ovine embryos using fresh or cryopreserved semen. Small Rum. Res., 110: 36-41.
Saacke, RG; Dalton, JC; Nadir, S; Nebel, RL and Bame, JH (2000). Relationship of seminal traits and insemination time to fertilization rate and embryo quality. Anim. Reprod. Sci., 60: 663-677.
Sanchez, R; Stale, T; Khanago, O; Turley, H; Gips, H and Schill, WB (1996). Sperm selection methods for intracytoplasmic sperm injection (ICSI) and andrological patients. J. Assist. Reprod. Gen., 13: 228-233.
Scholkamy, TH; Mahmoud, KGhM; El Zohery, FA and Ziada, MS (2009). Evaluation of sephadexfiltration for freezability and in vitro fertilizing ability of buffalo semen. Glob. Vet., 3: 144-150.
Shoukir, Y; Chardonnens, D; Campana, A and Sakkas, D (1998). Blastocyst development from supernumery embryos after in-tracytoplasmic sperm injection: a paternal influence? Hum. Reprod., 13: 1632-1637.
Watson, PF (1995). Recent developments and concepts in the cryopreservation of spermatozoa and the assessment of their post-thawing function. Reprod. Fertil. Dev., 7: 871-891.
Zhang, BR; Larson, B; Lundeheim, N and Roderiguez Martinez, H (1998). Sperm characteristics and zonapellucida binding in relation to field fertility of frozen-thawed semen from dairy AI bulls. Int. J. Androl., 21: 207-216.