مطالعه اثر محیط‌های TALP و تریس سیترات بر ظرفیت پذیری اسپرم بز و تولید جنین‌های آزمایشگاهی متعاقب ظرفیت پذیری اسپرم‌ها در این محیط‌ها

نوع مقاله : مقاله کوتاه

نویسندگان

چکیده

هدف از انجام مطالعه حاضر مقایسه اثر محیط‌های TALP و تریس سیترات بر ظرفیت پذیری اسپرم بز بود. در آزمایش 1 ظرفیت پذیری اسپرم با روش اندازه‌گیری کلرتتراسیکلین و در آزمایش 2 به وسیله بررسی میزان باروری اسپرم در شرایط آزمایشگاهی و بررسی تکامل جنینی مورد ارزیابی قرار گرفت. در آزمایش 2 توده‌های تخمک کومولوس (COCs) با برش در تخمدان‌های بزی که به مدت 27 ساعت در محیط بالغ سازی با اتمسفر مرطوب حاوی 5% CO2 و دمای 5/38 درجه سانتیگراد به بلوغ رسیده بودند استخراج شدند. تعداد 2480 تخمک بالغ شده در شرایط آزمایشگاهی انتخاب و به طور تصادفی به 2 گروه تقسیم شدند. در گروه 1 تخمک‌های بالغ (1124 عدد) به وسیله اسپرماتوزواهای ظرفیت پذیر شده در محیط TALP و در گروه 2 نیز تخمک‌های بالغ (1356 عدد) به وسیله اسپرماتوزواهایی که ظرفیت پذیری را در محیط تریس سیترات طی کردند، بارور شدند. نتایج آزمایش 1 به طور مقایسه‌ای نشان داد که تعداد اسپرم‌هایی که در آزمون CTC الگوی B را نشان می‌دهند، در محیط تریس سیترات بسیار بیش‌تر از محیط TALP هستند (91/0 ± 32/55% در مقابل 20/0 ± 96/47%). در آزمایش 2 نرخ تقسیم و نیز تولید بلاستوسیت‌‌ها در اسپرماتوزواهای ظرفیت پذیر شده در محیط تریس سیترات بیش‌تر از محیط TALP بود. در نتیجه به منظور رسیدن به نرخ بالاتر تقسیم و همچنین تولید بیش‌تر بلاستوسیت‌ها در بز می‌توان از تریس سیترات به عنوان جایگزین و یک روش موثر برای ظرفیت پذیری اسپرم‌ها استفاده کرد.

کلیدواژه‌ها


Aitken, RJ and Nixon, B (2013). Sperm capacitation: a distant landscape glimpsed but unexplored. Mol. Hum. Reprod., 19: 785-793.
Bavister, BD (2002). Early history of in vitro fertilization. Reproduction. 124: 181-196.
Bedford, JM (1983). Significance for need for sperm capacitation before fertilization in eutherian mammals. Biol. Reprod., 28: 108-120.
Braude, P; Bolton, V and Moore, S (1988). Human gene expression first occurs between the four- and eight-cell stages of preimplantation development. Nature. 332: 459-461.
Crozet, N; Ahmed-Ali, M and Dubos, MP (1995). Developmental competence of caprine oocytes from follicles of different size categories following maturation, fertilization and culture in vitro. J. Reprod. Fertil., 103: 293-298.
Dar, S; Grover, SA; Moskovtsev, SI; Swanson, S; Baratz, A and Librach, CL (2013). In vitro fertilization-intracytoplasmic sperm injection outcome in patients with a markedly high DNA fragmentation index (>50%). Fertil. Steril., 100: 75-80.
Elkhawagah, AR; Longobardi, V; Gasparrini, B; Sosa, GA; Bifulco, G; Abouelroos, MEA; Abd el-ghafar, AE and Campanile, G (2013). Evaluation of in vitro capacitation of buffalo frozen/thawed sperm by different tsechniques. J. Reprod. Infertil., 4: 19-28.
First, NL and Parrish, JJ (1987). In-vitro fertilization of ruminants. J. Reprod. Fertil., 34: 151-165.
Fraser, LR; Abeydeera, LR and Niwa, K (1995). Ca(2+)-regulating mechanisms that modulate bull sperm capacitation and acrosomaleocytosis as determined by chlortetracycline analysis. Mol. Reprod. Dev., 40: 233-241.
Gangwar, C; Kharche, SD; Ranjan, R; Kumar, S; Goel, AK; Jindal, SK and Agarwal, SK (2015). Effect of vitamin C supplementation on freezability of Barbari buck semen. Small Rum. Res., 22: 104-107.
Kharche, SD; Agarwal, S; Sharma, J; Sikarwar, AKS; Gangwar, C; Ranjan, R; Goel, AK; Jindal, SK and Agarwal, SK (2016). Influence of cysteamine supplementation during in vitro culture of early stage caprine embryos on blastocyst production. Indian J. Anim. Sci., 86: 304-306.
Kharche, SD; Goel, AK; Jindal, SK; Goel, P and Jha, BK (2011). Birth of twin kids following transfer of in-vitro produced caprine embryos. Indian J. Anim. Sci., 81: 1132-1134.
Kharche, SD; Goel, AK; Jindal, SK and Sinha, NK (2007). Birth of a female kid from in-vitro matured and fertilized caprine oocytes. Indian J. Anim. Sci., 78: 680-685.
Kharche, SD; Goel, AK; Jindal, SK; Sinha, NK and Yadav, P (2008a). Effect of somatic cells co-cultures on cleavage and development of in-vitro fertilized caprine embryos. Indian J. Anim. Sci., 78: 686-692.
Kharche, SD; Jindal, SK; Priyadhrashini, R; Kumar, S; Goel, AK; Ramachandran, N and Rout, PK (2013). Fertility following frozen semen artificial insemination in Jamunapari goats. Indian J. Anim. Sci., 83: 1071-1073.
Kharche, SD; Yadav, EN; Goel, AK; Jindal, SK and Sinha, NK (2008b). Influence of culture media on in-vitro fertilization of caprine oocytes. Indian J. Anim. Sci., 78:
1075-1077.
Perez, LJ; Vakkrcel, A; de lasHeras, MA; Moses, DF and Baldassarre, H (1996). In vitro capacitation and induction of acrosomal exocytosis in ram spermatozoa as assessed by the chlortetracycline assay. Theriogenology. 45: 1037-1046.
Slavik, T and Fulka, J (1992). In vitro fertilization of intact sheep and cattle oocytes with caprine spermatozoa. Theriogenology. 38: 721-726.
Snedecor, GW and Cochran, WG (1989). Statistical methods. 8th Edn., Ames, IowaStateUniversity Press. P: 466.
Wu, B; Zan, L; Quan, F and Wang, H (2015). A novel discipline in embryology — animal embryo breeding. In: Wu, B (Ed.), New discoveries in embryology. (1st Edn.), Published by AvE4EvA. PP: 185-198.
Yanagimachi, R (1994). Fertility of mammalian spermatozoa: its development and relativity. Zygote. 2: 371-372.