تکامل ELISA غیر مستقیم بر پایه OMP برای اندازه‌گیری تیترهای آنتی بادی پاستورلا مولتوسیدا در گاوها

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

چکیده

 پاستورلا مولتوسیدا (Pasteurella multocida)، یک پاتوژن مهم حیوانات اهلی مختلف می‌باشد. پروتئین‌های غشای خارجی (OMPs) نقش عمده‌ای در پاتوژنز و ایمنی‌زایی پاستورلا مولتوسیدا ایفا می‌کنند. هدف این مطالعه تکامل روش سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) بر پایه OMPs جهت تعیین تیترهای آنتی بادی در حیوانات پس از عفونت یا جهت اندازه‌گیری قدرت واکسن بود. OMPs از پاستورلا مولتوسیدا P:52 (سویه واکسن) و پاستورلا مولتوسیدا B:2 جدا شده از وقوع طبیعی سپتی سمی هموراژیک (HS) استخراج و خالص سازی شدند و روی SDS PAGE و از طریق western blot آنالیز شدند. پروفایل OMPs سویه واکسن و جدایه گرفته شده از وقوع طبیعی HS مشابه یکدیگر بودند. بهینه سازی ترکیبات مختلف مانند آنتی ژن‌های کوتینگ، کنژوگه ضد گونه و غیره علیه سرم هایپر ایمیون و پری ایمیون آنتی-پاستورلا مولتوسیدا انجام شد. اعتبارسنجی روش ELISA غیر مستقیم بر پایه OMP جهت اندازه‌گیری پاسخ ایمنی در برابر پاستورلا مولتوسیدا در گاو، حساسیت تشخیصی (DSN) 91% و ویژگی تشخیصی (DSP) تقریبا 100% در نقطه برش 25% را تأیید نمود. ELISA غیر مستقیم بر پایه OMP در مقایسه با روش بر پایه WCL اختصاصی‌تر بوده، اما دارای حساسیت کمتری بود.

کلیدواژه‌ها

فایل ها

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار