آنالیز بیان خالص‌ سازی و گلیکوزیله شدن قسمت VP2 ویروس بیماری بورس عفونی ماکیان در مخمر

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

چکیده

بیماری بورس عفونی (IBD) یک بیماری نابود کننده و به شدت واگیر در ماکیان جوان می‌باشد و عامل ایجاد کننده آن ویروس بیماری بورس عفونی می‌باشد (IBDV). به منظور بهینه کردن ایمنی‌زایی واکسن تحت واحدی نو ترکیب IBDV، از واکسن IBD حاوی آنتی‌ژن mVP2 گلیکوزیله شده استفاده گردید. در ابتدا ژن mVP2 ویروس IBDV همراه با یک توالی اسید نوکلئیک کد گذاری شده اپی‌توپ سلولی B ویروس IBDV (KFDQML) در انتهای 5´ ژن VP2، همراه با یک توالی اسید نوکلئیک کد گذاری شده اپی‌توپ سلولی B ویروس IBDV (LASP) و برچسب هیستیدینی (His) در انتهای 3´ ژن VP2 کلون گردید. سپس پروتئین mVP2 ویروس IBDV در مخمر متیلوتروف Pichia pastoris که می‌تواند پروتئین گلیکوزیله را ترشح کند، بیان گردید. پروتئین نو ترکیب mVP2 با رنگ‌آمیزی PAS به رنگ صورتی در می‌آید که بیانگر گلیکوزیله شدن آن می‌باشد. در انتها پروتئین mVP2 ویروس IBDV با استفاده از ستون هیستیدینی کروماتوگرافی خالص گردید. نتایج نشان داد که پروتئین گلیکوزیله ویروس IBDV تغییر یافته با پپتیدهای اپی‌توپ می‌تواند در مخمر Pichia pastoris بیان گردد. این تحقیق زمینه‌ای برای توسعه و تکامل یک واکسن نو ترکیب بیماری بورس عفونی با ایمنی‌زایی بالا را فراهم می‌کند.

کلیدواژه‌ها