ارزیابی کوپروآنتی‌ژن‌های انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس با استفاده از روش دات-بلاتینگ در سگ

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

چکیده

میزبان‌های اصلی انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس گوشتخواران مانند سگ، گرگ و روباه هستند. چون تشخیص تخم این انگل با روش آزمایش مدفوع امکان‌پذیر نیست؛ بنابراین در مطالعه حاضر، آزمایش دات-بلاتینگ برای کوپروآنتی‌ژن‌های اختصاصی اکینوکوکوس گرانولوزوس در مدفوع سگ مورد ارزیابی قرار گرفته است. سه توله 2 تا 3 ماهه با استفاده از داروی پیپرازین علیه نماتودهای روده‌ای درمان شدند و پس از گذشت چند روز مدفوع آن‌ها به عنوان نمونه قبل از عفونت جمع‌آوری گردید. یک هفته پس از درمان، سه توله سگ با کبد و ریه آلوده به کیست هیداتید به مدت چند روز تغذیه شدند. در پایان هر هفته (تا 5 هفته) مدفوع آن‌ها به عنوان نمونه پس از عفونت جمع‌آوری گردید. پروتئین‌های محلول در نمونه‌های قبل و پس از عفونت آماده شد و آزمایش دات-بلاتینگ روی گونه‌ها انجام گردید. همچنین 15 نمونه مدفوع ارجاعی از بیمارستان دامپزشکی رازی مشهد ابتدا مورد آزمایش تخم کرم قرار گرفتند و سپس آزمایش دات-بلات بر روی آن‌ها انجام شد. برای تشخیص بافته‌های پروتئینی انگل، آزمایش      SDS-PAGE انجام شد. بر اساس نتایج به دست آمده از هفته اول تا پنجم پس از عفونت، افزایش لکه‌های رنگی در سگ‌های عفونی شده مشاهده می‌شود. از 15 نمونه ارجاعی از درمانگاه خصوصی، در 4 نمونه واکنش مثبت رنگی در آزمایش دات-بلاتینگ مشاهده گردید، و همین 4 نمونه در آزمایش میکروسکوپیک تخم کرم نیز مثبت بودند. در آزمایش SDS-PAGE، چهار باند در نمونه‌های مدفوع هفته پنجم پس از عفونت مشاهده گردید. وزن مولکولی باندها به ترتیب 14، 22، 36 و 45 کیلو دالتون بود. نتایج این تحقیق دلالت بر این دارد که آزمایش دات-بلاتینگ روش مناسبی برای تشخیص سگ‌های آلوده به اکینوکوکوس کرانولوزوس نمی‌باشد و توصیه می‌گردد که جهت تشخیص کوپروآنتی‌ژن‌های اکینوکوکوس گرانولوزوس از روش کوپروآنتی‌ژن-الیزا استفاده گردد.

کلیدواژه‌ها