سروتیپ‌ها، ژن‌های حدت و پلی مورفیسم خوشه ژن کپسول در لاکتوکوکوس گارویه آ جدا شده از ماهی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss) بیمار و تمساح پوزه کوتاه (Crocodylus palustris) در ایران

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

چکیده

پیشینه: لاکتوکوکوس گارویه آ عامل ایجاد لاکتوکوکوزیس در ماهی قزل آلای رنگین کمان در بسیاری از نقاط جهان است. هدف: این مطالعه به منظور بررسی وجود فاکتورهای حدت و تمایز دو سروتیپ لاکتوکوکوس گارویه آ انجام شد. روش کار: بیست و دو جدایه لاکتوکوکوس گارویه آ جدا شده از ماهیان قزل آلای رنگین کمان بیمار از مزارع مناطق مختلف و تمساح پوزه کوتاه در ایران مورد بررسی قرار گرفتند. به منظور تشخیص سریع وجود ژن‌های حدت hly1، hly2، hly3، NADH oxidase، sod، pgm، adhPsaA، eno، LPxTG-3، adhCI، و adhCII دو آزمون واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) چندگانه طراحی شد. همچنین، آزمون PCR ساده جهت شناسایی سروتیپ‌های باکتریایی، ژن‌های حدت CGC، LPxTG-2، Adhesion، و adhPav با استفاده از آغازگرهای اختصاصی انجام شد. نتایج: همه واریته‌های لاکتوکوکوس گارویه آ دارای ژن‌های حدت hly1، hly2، hly3، NADH oxidase، pgm، adhPav، LPxTG-3، sod، eno، adhPsaA، adhCI و CGC بودند. همچنین ژن AdhCII در همه سویه‌ها به جز یکی از سویه‌های جدا شده از تمساح پوزه کوتاه وجود داشت. علاوه بر این، ژن LPxTG-2 تنها در یکی از جدایه‌های متعلق به تمساح پوزه کوتاه وجود داشت. ژن‌ حدت adhesion در هیچ یک از سویه‌های مورد بررسی در این مطالعه یافت نشد. قابل توجه اینکه، تمام 22 جدایه از هر دو میزبان به عنوان سروتیپ I شناسایی شدند. بر اساس توالی فیلوژنتیکی حاصل از ترادف خوشه ژن کپسول، تمام جدایه‌های باکتریایی حاصل از ماهی همراه با یکی از جدایه‌های حاصل از تمساح پوزه کوتاه در یک خوشه گروه‌بندی شدند. نتیجه‌گیری: مطالعات بیشتری جهت بررسی نقش ژن‌های حدت در لاکتوکوکوس گارویه آ و ارزیابی بیماری‌زایی آن‌ها در ماهی قزل آلای رنگین کمان توصیه می‌شود.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


Akhlaghi, M and Keshavarzi, M (2002). The occurrence of streptococcosis in the cultured rainbow trout of Fars province. Iran. J. Vet. Res., 2: 183-189.
Coutte, L; Alonso, S; Reveneau, N; Willery, E; Quatannens, B; Locht, C and Jacob-Dubuisson, F (2003). Role of adhesin release for mucosal colonization by a bacterial pathogen. J. Exp. Med., 197: 735-742. https://doi.org/10. 1084/jem.20021153.
Englen, MD and Kelley, LC (2000). A rapid DNA isolation procedure for the identification of Campylobacter jejuni by the polymerase chain reaction. Lett. Appl. Microbiol., 31: 421-426. https://doi.org/10.1046/j.1365-2672.2000.00841. x.
Erfanmanesh, A; Soltani, M; Pirali, E; Mohammadian, S and Taherimirghaed, A (2012). Genetic characterization of Streptococcus iniae in diseased farmed rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) in Iran. Sci. World J., 2012: 1-6. http://dx.doi.org/10.1100/2012/594073.
Fukuda, Y; Tue, Y; Oinaka, D; Wada, Y; Yamashita, A; Urasaki, S; Yoshioka, S; Kimoto, K and Yoshida, T (2015). Pathogenicity and immunogenicity of non-agglutinating Lactococcus garvieae with Anti-KG (-) phenotype rabbit serum in Seriola spp. Fish. Pathol., 50: 200-206. https://doi.org/10.3147/jsfp.50.200.
Karsidani, SH; Soltani, M; Nikbakhat-Brojeni, G; Ghasemi, M and Skall, HF (2010). Molecular epidemiology of zoonotic streptococcosis/lactococcosis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) aquaculture in Iran. Iran. J. Microbiol., 2: 198-209.
Mata, AI; Gibello, A; Casamayor, A; Blanco, MM; Domínguez, L and Fernández-Garayzábal, JF (2004). Multiplex PCR assay for detection of bacterial pathogens associated with warm-water streptococcosis in fish. Appl. Environ. Microbiol., 70: 3183-3187. https://doi.org/10.1128 /AEM.70.5.3183-3187.2004.
Meyburgh, CM; Bragg, RR and Boucher, CE (2017). Lactococcus garvieae: an emerging bacterial pathogen of fish. Dis. Aquat. Organ., 123: 67-79. https://doi.org/10. 3354/dao03083.
Miyauchi, E; Toh, H; Nakano, A; Tanabe, S and Morita, H (2012). Comparative genomic analysis of Lactococcus garvieae strains isolated from different sources reveals candidate virulence genes. Int. J. Microbiol., 2012: 1-6. http://dx.doi.org/10.1155/2012/728276.
Morita, H; Toh, H; Oshima, K; Yoshizaki, M; Kawanishi, M; Nakaya, K; Suzuki, T; Miyauchi, E; Ishii, Y; Tanabe, S and Murakami, M (2011). Complete genome sequence and comparative analysis of the fish pathogen Lactococcus garvieae. PLoS ONE. 6: e23184. https://doi. org/10.1371/journal.pone.0023184.
Ohbayashi, K; Oinaka, D; Hoai, TD; Yoshida, T and Nishiki, I (2017). PCR-mediated identification of the newly emerging pathogen Lactococcus garvieae serotype II from Seriola quinqueradiata and S. dumerili. Fish. Pathol., 52: 46-49. https://doi.org/10.3147/jsfp.52.46.
Ooyama, T; Hirokawa, Y; Minami, T; Yasuda, H; Nakai, T; Endo, M; Ruangpan, L and Yoshida, T (2002). Cell-surface properties of Lactococcus garvieae strains and their immunogenicity in the yellowtail Seriola quinqueradiata. Dis. Aquat. Org., 51: 169-177. https://doi.org/10.3354/ dao051169.
Raissy, M; Sarshoughi, M and Moumeni, M (2016). Molecular identification of some causative agents of warm-water streptococcosis by M-PCR in cultured rainbow trout, Chaharmahal-Bakhtiari Province, Iran. Iran. J. Fish. Sci., 15: 836-845. http://jifro.ir/article-1-2224-en.html.
Sharifiyazdi, H; Akhlaghi, M; Tabatabaei, M and Mostafavi Zadeh, SM (2010). Isolation and characterization of Lactococcus garvieae from diseased rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum) cultured in Iran. Iran. J. Vet. Res., 11: 342-350.
Shin, GW; Nho, SW; Park, SB; Jang, HB; Cha, IS; Ha, MA; Kim, YR; Dalvi, RS; Joh, SJ and Jung, TS (2009). Comparison of antigenic proteins from Lactococcus garvieae KG (−) and KG (+) strains that are recognized by olive flounder (Paralichthys olivaceus) antibodies. Vet. Microbiol., 139: 113-120. https://doi.org/10.1016/j.vetmic. 2009.05.007.
Sneath, PH and Sokal, RR (1973). Numerical taxonomy. The principles and practice of numerical classification. 1st Edn., San Francisco, USA, W. H. Freeman & Company. P: 573.
Stipcevic, T; Piljac, T and Isseroff, RR (2005). Di-rhamnolipid from Pseudomonas aeruginosa displays differential effects on human keratinocyte and fibroblast cultures. J. Dermatol. Sci., 40: 141-143. https://doi.org/10. 1016/j.jdermsci.2005.08.005.
Tamura, K; Dudley, J; Nei, M and Kumar, S (2007). MEGA4: molecular evolutionary genetics analysis (MEGA) software version 4.0. Mol. Biol. Evol., 24: 1596-1599. https://doi.org/10.1093/molbev/msm092.
Ture, M and Altinok, I (2016). Detection of putative virulence genes of Lactococcus garvieae. Dis. Aquat. Org., 119: 59-66. https://doi.org/10.3354/dao02981.
Türe, M; Haliloğlu, Hİ; Altuntaş, C; Boran, H and Kutlu, İ (2014). Comparison of experimental susceptibility of Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss), Turbot (Psetta maxima), Black Sea Trout (Salmo trutta labrax) and Sea Bass (Dicentrarchus labrax) to Lactococcus garvieae. Turk. J. Fish. Aquat. Sci., 14: 507-513. https://doi.org/10. 4194/1303-2712-v14_2_22.
Vanaporn, M; Wand, M; Michell, SL; Sarkar-Tyson, M; Ireland, P; Goldman, S; Kewcharoenwong, C; Rinchai, D; Lertmemongkolchai, G and Titball, RW (2011). Superoxide dismutase C is required for intracellular survival and virulence of Burkholderia pseudomallei. Microbiology. 157: 2392-2400. https://doi.org/10.1099/ mic.0.050823-0.
Yoshida, T; Endo, M; Sakai, M and Inglis, V (1997). A cell capsule with possible involvement in resistance to opsonophagocytosis in Enterococcus seriolicida isolated from yellowtail Seriola quinqueradiata. Dis. Aquat. Org., 29: 233-235. https://doi.org/10.3354/dao029233.