Shiraz University Iranian Journal of Veterinary Research 1728-1997 26 4 2025 12 21 Preparation and evaluation of homologous IgG on canine parvovirus تهیه و ارزیابی ایمونوگلوبولین G همولوگ بر پاروویروس سگ 333 340 8743 10.22099/ijvr.2025.52828.7901 EN M. Bakhshesh Department of Animal Virology, Research and Diagnosis, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Organization (AREEO), Karaj, Iran M. H. Motedayen Department of Sera Purification, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Organization (AREEO), Karaj, Iran S. Jamshidi Department of Internal Medicine, Veterinary Faculty, University of Tehran, Tehran, Iran N. Azadi Dog Training Center of Anti-Narcotic Police (SEPCA), Karaj, Iran N. Zarifian Department of Internal Medicine, Veterinary Faculty, University of Tehran, Tehran, Iran M. H. Rabiee Department of Clinical Trial, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Organization (AREEO), Karaj, Iran N. Ghahari Department of Internal Medicine, Veterinary Faculty, University of Tehran, Tehran, Iran Journal Article 2025 03 29 <strong>Background:</strong> Canine parvovirus, an important and highly pathogenic agent for puppies, is distributed worldwide. Despite the various vaccines being available, it is not easily prevented. Immunoglobulin therapy has been attempted as a supportive approach to cure affected puppies. <strong>Aims:</strong> In order to achieve a homologous immunoglobulin G (IgG) for the treatment of the fatal parvovirus, the purification of anti-parvovirus IgG from immunized dogs was assayed. <strong>Methods:</strong> IgG purification was conducted on the obtained immune sera using two-stage dialysis, in which various concentrations of ammonium sulfate with several incubations and centrifugations were applied in multiple steps. <strong>Results:</strong> Using SDS-PAGE electrophoresis, the correct band sizes of the purified IgGs were observed and its concentration was assessed to be >22 mg/ml. Also, using quantitative ELISA, the specific anti-parvovirus IgG titer of the purified dog IgG was calculated to be considerably above the protective threshold titer. To do so, 13 parvoviral diarrheic puppies were randomly categorized into 3 treatment groups for 5 consecutive days. Administration of 4, 8 and 16 mg/kg bw/d of purified IgG to these puppies significantly improved all clinical symptoms including diarrhea, dehydration, appetite, vomiting and white blood cell (WBC) in all affected puppies in dose-dependent manner, comparing with those in the placebo-controlled group (n=8) that experienced 2 deaths, too. <strong>Conclusion:</strong> This homologous anti-parvovirus IgG, which was purified through a novel, simple and inexpensive technology is expected to pass further clinical trials. Also, this IgG has the potential as a commercial product to reduce the burden of parvovirus infection in puppies. <strong>پیشینه:</strong> پارووویروس سگ سانان یکی از عوامل اصلی بیماری‌زا در توله ‌سگ‌ها در سراسر جهان به شمار می‌رود. علی‌رغم واکسن‌های متعددی که در دسترس هستند، پیشگیری از این بیماری به سادگی امکان‌پذیر نیست. بنابراین بهره‌گیری از ایمونوگلوبولین‌ها به عنوان یک رویکرد درمانی حمایتی برای توله‌ سگ‌های مبتلا به پاروویروس مورد بررسی قرار گرفته است. <strong>هدف:</strong> به منظور دستیابی به ایمونوگلوبولین G همولوگ ضد پاروویروس برای درمان پاروویروس سگ، تخلیص ایمونوگلوبولین از سگ‌های ایمن بر علیه پاروویروس انجام گرفت. <strong>روش ‌کار:</strong> خالص‌سازی IgG از سرم‌ خون سگ‌های ایمن شده علیه پارووویروس با استفاده از دیالیز دو مرحله‌ای انجام شد که در آن از غلظت‌های مختلف سولفات آمونیوم و چندین مرحله انکوباسیون و سانتریفیوژ بهره گرفته شد. <strong>نتایج:</strong> نتایج الکتروفورز SDS-PAGE نشان داد که IgG به طور کامل تخلیص گردیده و غلظت آن بیش از 22 میلی‌گرم در میلی‌لیتر برآورد گردید. همچنین، با استفاده از روش ELISA، عیار IgG ضد پارووویروس به طور قابل توجه بالاتر از آستانه محافظتی برآورد گردید. تزریق دوزهای 4، 8 و 16 میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن در روز از IgG خالص شده به 13 توله‌ سگ مبتلا به پارووویروس که به طور تصادفی به سه گروه درمانی تقسیم شده بودند، به مدت 5 روز متوالی، تمام علائم بالینی شامل اسهال، کم‌آبی، بی‌اشتهایی، استفراغ و کاهش تعداد گلبول‌های سفید (WBC) را به طور معنی‌دار در مقایسه با گروه کنترل دارونما  (n=8)که دو مورد مرگ نیز داشتند، بهبود بخشید. <strong>نتیجه‌گیری:</strong> انتظار می‌رود IgG همولوگ ضد پارووویروس که با استفاده از یک فناوری ساده و کم هزینه تخلیص گردید، با گذراندن مطالعات بالینی تکمیلی، به عنوان یک محصول تجاری، بتواند عوارض ناشی پاروویروس را در توله ‌سگ‌های مبتلا کاهش دهد. https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_8743_f2545b779879208faffbecfefee9818a.pdf