Shiraz University Iranian Journal of Veterinary Research 1728-1997 20 2 2019 06 01 Comparison of different diluents based on liposomes and egg yolk for ram semen cooling and cryopreservation مقایسه رقیق کننده‌های مختلف بر پایه لیپوزوم و زرده تخم مرغ برای سرد کردن و انجماد منی قوچ 126 130 5262 10.22099/ijvr.2019.5262 EN J. R. Luna-Orozco Higher Education Unit Agricultural Technology and Marine Sciences, Center for Agricultural Technological Baccalaureate, No. 1, Coahuila, Mexico M. A. González-Ramos Graduated from Postgraduate Department of Agricultural Production, Autonomous Agrarian University Antonio Narro, Coahuila, Mexico G. Calderón-Leyva Higher Education Unit Agricultural Technology and Marine Sciences, Center for Agricultural Technological Baccalaureate, No. 216, Durango, Mexico L. R. Gaytán-Alemán Department of Animal Production, Autonomous Agrarian University Antonio Narro, Coahuila, Mexico F. Arellano-Rodríguez Department of Animal Production, Autonomous Agrarian University Antonio Narro, Coahuila, Mexico O. Ángel-García Department of Veterinary Sciences, Autonomous Agrarian University Antonio Narro, Coahuila, Mexico F. G. Véliz-Deras Department of Veterinary Sciences, Autonomous Agrarian University Antonio Narro, Coahuila, Mexico Journal Article 2018 06 19 <strong>Background:</strong> Sperm cryopreservation is an important tool for breed improvement, nonetheless, spermatozoids of rams are extremely sensitive to cryopreservation. <strong>Aims:</strong> The present research was to compare a liposome-based (OptiXcell: OX) diluent, a commercial TRIS-egg yolk (Optidyl: OP) and a citrate egg yolk-based (CY) diluent on ovine semen quality through the cryopreservation process. <strong>Methods:</strong> Semen was collected from four sexually mature Dorper rams during the natural breeding season. After collection, semen was evaluated and diluted in OX, OP or CY diluent and was cooled from 37°C to 4°C for 2 h (refrigerated semen, RS), after that semen<strong>-</strong>filled straws were placed in liquid nitrogen (LN) vapour for 10 min, then immersed into LN at -196°C (cryopreserved semen, CS) and stored until evaluation. <strong>Results:</strong> For fresh semen (FS), similar values (P>0.05) were obtained from the 3 diluents [motility (4.2 ± 0.3), viability (75.4 ± 3.2), hypo-osmotic swelling test (HOST) (59.2 ± 2.1), and normality (84.7 ± 3.5)]. The motility values were higher for RS with OX and CY (4.0 ± 0.2 and 3.6 ± 0.3, respectively) compared to OP (3.0 ± 0.21; P<0.05). The viability was reduced after refrigeration and freezing (P<0.05). Refrigerated semen viability was similar for OX (65%), CY (63%) and OP diluents (60%; P>0.05), but for frozen semen, viability was lower in the CY diluent (P<0.05). Membrane integrity (HOST) in OX (53.6 ± 1.7) was similar to that in OP (50.7 ± 1.5; P>0.05) but higher than in CY (48.7 ± 1.5; P<0.05). <strong>Conclusion:</strong> No difference was found between the OX diluents and those made with egg yolk in terms of sperm parameters; however, the OX diluent was more efficient in protecting the integrity of membrane in freezing/thawing semen. <strong>پیشینه:</strong> انجماد اسپرم‌ها یکی از روش‌های مهم برای بهبود نژاد حیوانات است با این وجود اسپرماتوزئیدهای قوچ‌ به انجماد بسیار حساس هستند. <strong>هدف:</strong> هدف از پژوهش حاضر، مقایسه استفاده از رقیق کنندهای بر پایه لیپوزوم (اپتیکسل، OX)، -TRISزرده تخم مرغ تجاری (اپتیدیل، OP) و بر پایه زرده تخم مرغ سیتراته (CY) بر کیفیت منی گوسفند در مراحل انجماد بود. <strong>روش کار:</strong> منی چهار قوچ‌ بالغ نژاد دورپر در فصل جفت گیری (26° N، نوامبر) جمع‌آوری شد. منی پس از جمع‌آوری، ارزیابی و سپس در رقیق کننده‌های OX، OP یا CY رقیق شد. نمونه‌های منی از دمای 37 درجه سانتیگراد در طی 2 ساعت به دمای 4 درجه سانتیگراد رسانده شد (مایع منی خنک شده، RS)، پس از آن نمونه‌های منی در نی‌ها بسته بندی و در بخار نیتروژن مایع (LN) به مدت 10 دقیقه قرار داده شده و سپس در نیتروژن مایع در دمای 196- درجه سانتیگراد (منی منجمد، CS) غوطه ور شده و تا زمان ارزیابی نگهداری شدند. <strong>نتایج:</strong> در منی‌های تازه (FS)، نتایج مشاهده شده برای هر 3 رقیق کننده یکسان بود (P>0.05) ]حرکت (3/0 ± 2/4)، زنده مانی (2/3 ± 4/75)، تست تورم هیپو اسموتیک (HOST) (1/2 ± 2/59) و نرمالیتی (5/3 ± 7/84)[. حرکت اسپرم‌ها در منی‌های نگهداری شده در یخچال (RS) با OX و OY (به ترتیب 2/0 ± 0/4 و 3/0 ± 6/3) در مقایسه به OP (21/0 ± 0/3؛ P<0.05) بالاتر بود. زنده مانی اسپرم‌ها پس از نگهداری در یخچال و انجماد کاهش یافت (P<0.05). زنده مانی اسپرم‌ها در منی‌های نگهداری شده در یخچال در رقیق کننده OX (65%)، CY (63%) و OP (60%؛ P>0.05) مشابه ولی در منی‌های منجمد شده، در رقیق کننده CY نسبت به سایر رقیق کننده‌ها کم‌تر بود (P<0.05). یکپارچگی غشائی (HOST) با استفاده از رقیق کننده OX   (7/1 ± 6/53) مشابه رقیق کننده OP (5/1 ± 7/50؛ P>0.05) بود اما نسبت به رقیق کننده CY (5/1 ± 7/48؛ P<0.05) بالاتر بود. <strong>نتیجه‌گیری:</strong> هیچگونه تفاوتی بین رقیق کننده OX و رقیق کننده‌های تهیه شده از زرده تخم مرغ از نظر پارامترهای مربوط به اسپرم مشاهده نشد با وجود بر این رقیق کننده‌ OX در حفاظت از یکپارچگی غشاء در منی‌های قرار گرفته در شرایط انجماد/ذوب، کاراتر بود. https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_5262_43c217a800357211ed8b51977b975c20.pdf