Shiraz University Iranian Journal of Veterinary Research 1728-1997 19 4 2018 12 01 Different cell death types determination in juvenile mice ovarian follicles ارزیابی انواع مختلف مرگ سلولی در فولیکول‌های تخمدان موش نابالغ 298 303 5059 10.22099/ijvr.2018.5059 EN M. Pajokh Graduated from School of Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran F. Mesbah Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran H. Bordbar Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Histomorphometry & Stereology Research Center, Shiraz, Iran T. Talaei-Khozani Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran Journal Article 2018 02 24 Follicular atresia is a phenomenon that leads to evacuation of the ovary from the oocytes and the occurrence of menopause. The contribution of various types of cell death in atresia at different follicular developmental stages requires extensive investigation. In this study, we evaluated 3 types of programmed cell death (PCD), apoptosis, autophagy, and necrosis, in juvenile mouse ovary when we can observe all follicular stages as well as atresia. Ovaries from juvenile mice on the 21st post-natal (PN) day were prepared histologically for terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) to evaluate apoptosis and immunohistochemistry for beclin-1 to evaluate the autophagy marker. Necrotic cell death was also assessed by penetration of propidium iodide (PI). The count and percentage of the labeled follicles at different stages in the ovaries were evaluated and compared using the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. We detected TUNEL-positive granulosa cells in pre-antral and antral follicles but not in the primordial and primary follicles. Somatic cells and oocytes of primordial, primary, pre-antral and antral follicles reacted to beclin-1. The percentage of the PI-labeled primordial and primary follicles were significantly higher than the beclin-1 positive (P=0.01 and P=0.01). In conclusion, we showed that apoptosis, autophagy, and necrosis play a role in follicular atresia and the contributions of each one depends on the follicular stages. It was also demonstrated that necrosis happens particularly in the small follicles while in the large one, all three cell death types occurred with an equal ratio. آترزی فولیکولی پدیده‌ای است که منجر به تهی شدن تخمدان از تخمک و در نهایت وقوع یائسگی می‌گردد. مشارکت انواع مرگ سلولی در آترزی فولیکول‌ها در مراحل مختلف تکوینی، نیاز به بررسی گسترده دارد. در این مطالعه سه نوع مرگ برنامه‌ریزی شده سلولی (PCD) شامل آپوپتوز، اتوفاژی و نکروز در تخمدان موش نابالغ مورد بررسی قرار گرفت. تخمدان در این زمان محتوی همه رده‌های فولیکولی است و آترزی فولیکولی به وفور رخ می‌دهد. در این مطالعه تخمدان‌های موش‌های نابالغ در روز 21 بعد از تولد(PN) ، با کمک آزمون تانل(TUNEL) و ایمونوهیستوشیمی برایbeclin-1 (ارزیابی اتوفاژی) مورد بررسی قرار گرفتند. نکروز در تخمدان توسط ارزیابی نفوذپروپیدیوم یدید (PI) مشخص شد. درصد فولیکول‌های نشاندار شده با هر روش با آزمون‌های آماری کروسکال-والیس و من-ویتنی بررسی شد. آزمون تانل در سلول‌های گرانولوزای فولیکول‌های پره آنترال و آنترال و نه در فولیکول‌های بدوی و اولیه، مثبت شد. اووسیت و سلول‌های سوماتیک فولیکول‌های بدوی، اولیه، پره آنترال و آنترال از نظر بیانbeclin-1 مثبت بودند. درصد فولیکول‌های بدوی و اولیهPI مثبت به طور معنی‌داری از beclin-1مثبت بیشتر بود (هر دو P=0.01). در مجموع نتایج به دست آمده نشان داد که هر سه روش مرگ سلولی شامل آپوپتوز، اتوفاژی و نکروز در آترزی فولیکولی نقش دارد و مشارکت هر کدام از این سه نوع مرگ سلولی به مرحله تکوینی فولیکول بستگی دارد. همچنین نشان داده شد که نکروز بیشتر در فولیکول‌های کوچک رخ می‌دهد، در حالی که در آترزی فولیکول‌های بزرگ هر سه نوع مرگ سلولی سهم مساوی دارند.

https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_5059_1f24d5d51ce4d4d5804f94c646236a10.pdf