Shiraz University Iranian Journal of Veterinary Research 1728-1997 17 3 2016 09 01 Effects of cysteamine during in vitro maturation on viability and meiotic competence of vitrified buffalo oocytes اثر سیستئامین در طول بلوغ آزمایشگاهی بر زنده مانی و توانایی میوز تخمک‌های منجمد شده بوفالو 165 170 3810 10.22099/ijvr.2016.3810 EN K. Gh. M. Mahmoud Department of Animal Reproduction & Artificial Insemination (AI), National Research Center, Dokki, Giza, Egypt M. M. M. El-Sokary Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Benha University, Kaliobia, Egypt M. M. M. Kandiel Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Benha University, Kaliobia, Egypt M. E. A. Abou El-Roos Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Benha University, Kaliobia, Egypt G. M. S. Sosa Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Benha University, Kaliobia, Egypt Journal Article 2015 08 31 The aims of the present study were to assess the effects of cysteamine as an anti-oxidant on the rate of in vitro maturation (IVM) of buffalo oocytes (experiment 1), and their viability and nuclear status following vitrification (experiment 2). Immature oocytes with compact cumulus cells obtained from the ovaries of slaughtered animals were harvested and then cultured in the maturation medium with no cysteamine (control) or 50 μM cysteamine (treated). Oocytes were vitrified in vitrification solution 1 (VS1): 1.5 M ethylene glycol (EG) + 1.5 M dimethyl sulfoxide (DMSO) for 45 s (step one). After this initial exposure, oocytes were transferred to VS2: 3 M EG + 3 M DMSO in a holding medium for 25 s (step two). After warming, oocytes were evaluated morphologically and then cultured for a further 2 h in the cysteamine-supplemented or control maturation media. The oocytes were evaluated morphologically, stained with trypan blue for viability evaluation. The maturation rate of oocytes was higher (P<0.05) for IVM media with cysteamine compared with controls. There was no significant difference in morphology, survivability and maturation rate between the two<br />vitrification groups (cysteamine-treated and untreated groups) but the morphology, survivability and percentages of metaphase-II oocytes in both groups of vitrified oocytes were lower compared with their respective controls. In conclusion, the addition of cysteamine to the maturation medium improved nuclear maturation of buffalo oocytes but had no positive effect on their cryoresistance during vitrification. اهداف مطالعه حاضر بررسی اثرات سیستئامین به عنوان یک آنتی اکسیدان بر میزان بلوغ تخمک‌های بوفالو در محیط آزمایشگاه (آزمایش 1)، و زنده مانی و وضعیت هسته‌ای آن‌ها متعاقب انجماد شیشه‌ای (آزمایش 2) بودند. تخمک‌های نابالغ با سلول‌های متراکم کومولوس تهیه شده از تخمدان‌های حیوانات کشتار شده جمع‌آوری شدند و سپس در محیط کشت بلوغ بدون سیستئامین (کنترل) یا μM 50 سیستئامین (درمان شده) کشت داده شدند. تخمک‌ها در محلول انجماد شیشه‌ای 1 (VS1): M 5/1 اتیلن گلیکول (EG) + M 5/1 دی متیل سولفوکسید (DMSO) به مدت 45 ثانیه منجمد شدند (مرحله اول). بعد از این در معرض قرارگیری اولیه، تخمک‌ها به VS2: 3 M EG + 3 M DMSO در یک محیط نگهدارنده به مدت 25 ثانیه منتقل شدند (مرحله 2). بعد از ذوب شدن، تخمک‌ها از لحاظ مورفولوژی بررسی شدند و سپس به مدت 2 ساعت دیگر در محیط‌های کشت بلوغ کنترل یا مکمل سازی شده با سیستئامین کشت داده شدند. تخمک‌ها از لحاظ ظاهری مورد ارزیابی قرار گرفتند و با تریپان بلو برای بررسی زنده مانی رنگ آمیزی شدند. میزان بلوغ تخمک‌ها برای محیط کشت بلوغ آزمایشگاهی با سیستئامین در مقایسه با کنترل‌ها بیشتر بود (P<0.05). اختلاف معنی‌داری از لحاظ مورفولوژی، بقا و میزان بلوغ بین دو گروه انجمادی (گروه‌های درمان شده با سیستئامین و درمان نشده) وجود نداشت، اما مورفولوژی، بقا و درصدهای تخمک‌های متافاز II در هر دو گروه تخمک‌های منجمد شده در مقایسه با کنترل‌های مربوط به خود کمتر بودند. در نتیجه، افزودن سیستئامین به محیط کشت بلوغ، بلوغ هسته‌ای تخمک‌های بوفالو را بهبود بخشید، اما اثر مثبتی بر مقاومت به سرما در طول انجماد شیشه‌ای نداشت. https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_3810_84f13048b69ef0e460382d50217673e1.pdf