Shiraz University Iranian Journal of Veterinary Research 1728-1997 16 2 2015 06 01 Analysis of chromatin integrity and DNA damage of buffalo spermatozoa آنالیز انسجام کروماتین و آسیب DNA اسپرماتوزوآی بوفالو 161 166 3042 10.22099/ijvr.2015.3042 EN K. Gh. M. Mahmoud Department of Animal Reproduction and Artificial Insemination, National Research Center, Dokki, Giza, Egypt A. A. E. El-Sokary General Organization for Veterinary Services, Dokki, Giza, Egypt A. E. Abdel-Ghaffar Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Benha University, Kaliobia, Egypt M. E. A. Abou El-Roos Department of Theriogenology, Faculty of Veterinary Medicine, Benha University, Kaliobia, Egypt Y. F. Ahmed Department of Animal Reproduction and Artificial Insemination, National Research Center, Dokki, Giza, Egypt Journal Article 2014 08 12 This study was conducted to determine chromatin integrity and DNA damage by DNA electrophoresis and comet assays of buffalo fresh and frozen semen. Semen samples were collected from four buffalo bulls and evaluated after freezing for semen motility, viability, sperm abnormalities, chromatin integrity and DNA damage. A significant variation was found in semen parameters after thawing. Highly significant differences (P<0.001) in chromatin integrity were observed between fresh and frozen semen. For the fresh semen, there was no significant difference between the bulls for chromatin integrity; however, a significant variation (P<0.05) was detected in their frozen semen. No DNA fragmentation was observed by agarose gel electrophoresis. The percentage of sperm with damaged DNA detected by comet assay differed significantly between fresh and frozen semen. A significant negative correlation was recorded between motility and DNA damage (r=-0.68, P<0.05). Sperm abnormalities and DNA fragmentation were significantly positively correlated (r=0.59, P<0.05). In conclusion, DNA damage evaluation can provide reassurance about genomic normalcy and guide the development of improved methods of selecting spermatozoa with intact DNA to<br />be used in artificial insemination. این مطالعه به منظور تخمین انسجام کروماتین و آسیب DNA به وسیله الکتروفورز DNA و سنجش کامت در مایع منی تازه و منجمد بوفالو انجام گرفت. نمونه‌های مایع منی از چهار بوفالوی نر جمع‌آوری شدند، و مایع منی بعد از فریز از لحاظ تحرک اسپرم، زنده مانی، ناهنجاری‌های اسپرم، انسجام کروماتین و آسیب DNA بررسی شد. اختلاف معنی‌داری در پارامترهای مایع منی در میان گاوهای نر بعد از آب شدن پیدا شد. اختلاف‌های بسیار معنی‌داری (P<0.001) در انسجام کروماتین بین مایع منی تازه و منجمد مشاهده شدند. اختلاف معنی‌داری بین گاوها از نظر انسجام کروماتین در مایع منی تازه وجود نداشت، اما در مایع منی منجمد در میان گاوها اختلاف معنی‌داری شناسایی شد (P<0.05). قطعه قطعه شدن DNA به وسیله الکتروفورز ژل آگاروز دیده نشد. درصد اسپرم با DNA آسیب دیده با سنجش کامت به طور معنی‌داری بین مایع منی تازه و منجمد فرق می‌کرد. رابطه منفی معنی‌داری بین تحرک و آسیب به DNA (r=-0.68, P<0.05) وجود داشت و ناهنجاری‌های اسپرم و قطعه قطعه شدن DNA به طور قابل توجهی به شکل مثبت در ارتباط بودند (r=0.59, P<0.05). در نتیجه، ارزیابی آسیب DNA ممکن است اطمینان از نرمال بودن ژنوم را میسر ساخته و بتواند تکامل روش‌های اصلاح شده انتخاب اسپرماتوزوآ با DNA سالم را به منظور استفاده در تلقیح مصنوعی هدایت نماید. https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_3042_647ee009a41fcb0850bd2c5c3ea8a2e6.pdf