Shiraz University Iranian Journal of Veterinary Research 1728-1997 11 1 2010 03 01 Cloning and secretory expression of VP2 gene of infectious bursal disease virus in eukaryotic cells کلونینگ و بیان ترشحی ژن VP2 ویروس بیماری بورس عفونی در سلول‌های یوکاریوتی 72 77 178 10.22099/ijvr.2010.178 EN Sh. Ghafari Graduated from Faculty of Sciences, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran M. R. Seyfiabad Shapouri Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran H. Moatamedi Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran M. Roayaei Department of Biology, Faculty of Sciences, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran H. Goudarzi Department of Avian Medicine, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Karaj, Iran Journal Article 2008 11 24 VP2 gene coding region of a vaccinal strain (D78) of infectious bursal disease virus (IBDV) was cloned<br />in a eukaryotic expression vector, pSec Tag2A. The gene was placed downstream of Ig κ chain leader<br />sequence, under the control of human cytomegalovirus (hCMV) immediate early enhancer and promoter. The<br />construct pSec Tag2A-VP2 was transfected in COS-7 cell line and the expression and secretion of VP2 was<br />assessed by dot blotting and antigen capture ELISA. The antibody used in the immunological assays was a<br />neutralizing monoclonal antibody (1A6) against VP2. Positive reaction with the antibody indicated the<br />construct was functional with respect to expression and secretion of a native VP2. در این مطالعه ناحیه کد کننده ژن <em>VP2</em> یک سویه واکسینال (D78) ویروس بیماری بورس عفونی (IBDV) در یک ناقل بیانی یوکاریوتی به نام pSec Tag2A کلون شد. این ژن در پایین دست توالی پیشرو زنجیره سبک کاپا (κ) ایمونوگلوبولین، تحت کنترل توالی پروموتر و تشدید کننده بسیار نورس سیتومگالوویروس انسان (hCMV) قرار داده شد. ساختار به دست آمده        (pSec Tag2A-<em>VP2</em>) به تیره سلولی COS-7 انتقال داده شد و بیان و ترشح <em>VP2</em> با آزمایش های دات بلوتینگ و الیزای ویژه آنتی‌ژن بررسی گردید. آنتی‌بادی مورد استفاده در این آزمایش‌ها یک آنتی‌بادی منوکلونال خنثی کننده (1A6) بر علیه <em>VP2</em> بود. واکنش مثبت با این آنتی‌بادی نشان داد که ساختار تهیه شده قادر است شکل طبیعی <em>VP2</em> را بیان و ترشح کند.   https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_178_93ec014a3b375cb0258bab9970ea4de6.pdf