@article { author = {Vahedi, F. and Talebi, A. F. and Ghorbani, E. and Behroozikhah, A. M. and Shahriari Ahmadi, F. and Mahmoudi, M.}, title = {Isolation, cloning and expression of the Brucella melitensis Omp31 gene}, journal = {Iranian Journal of Veterinary Research}, volume = {12}, number = {2}, pages = {156-162}, year = {2011}, publisher = {Shiraz University}, issn = {1728-1997}, eissn = {2252-0589}, doi = {10.22099/ijvr.2011.58}, abstract = {Brucellosis is a zoonotic disease transmitted to humans either from animals or from their products.Although brucellosis can be found worldwide, the Mediterranean Basin, South and Central America, EasternEurope, Asia, Africa, the Caribbean, and the Middle East have currently been listed as high-risk regions. Thegenus Brucella is classified in at least nine species. Brucella melitensis is the global pathogenic species ofBrucella. The outer membrane protein 31, (Omp31) from B. melitensis is considered as a protectiveimmunogen and an important candidate vaccine. Contamination of purified Omp31 protein by biochemicalmethods has made some restrictions in practical experiments. In this study, the Omp31coding gene of B.melitensis Rev 1 strain was inserted in pET32b(+) plasmid with extra His-tag sequence. The integrity of theconstructed plasmid was confirmed using restriction enzyme mapping and sequencing. Omp31 wasexpressed after induction with IPTG in Escherichia coli BL21. Recombinant Omp31 (rOmp31) was purifiedby chromatography through Ni-agarose. The electrophoresis showed successful purification andimmunoblotting confirmed immunereactivity of rOmp31. Obtained rOmp31 could be used as a researchexperimental tool in protection assays to find its potential as a vaccine candidate.}, keywords = {Omp31,Brucellosis,Brucella melitensis,Cloning}, title_fa = {جداسازی، کلونینگ و بیان ژن Omp31 بروسلا ملیتنسیس}, abstract_fa = {بروسلوزیس یکی از بیماری‌های مشترک انسان و دام است که از طریق حیوانات یا فرآورده‌های حیوانی آلوده به انسان‌ها منتقل می‌شود. گرچه این بیماری در تمام نقاط دنیا گزارش شده است، اما در حال حاضر در نواحی مدیترانه‌ای، آمریکای جنوبی و غربی، اروپای شرقی، آسیا، آفریقا، نواحی کارائیب و خاورمیانه بیشتر یافت می‌شود. جنس بروسلا حداقل به نه گونه طبقه بندی شده است که گونه بروسلا ملیتنسیس بیماریزاترین گونه آن است که در تمام نقاط دنیا یافت می‌شود. یکی از پروتئین‌های غشایی خارجی بروسلا ملیتنسیس،Omp31 ، به عنوان یک ایمونوژن حفاظتی و نیز یک کاندید مهم واکسن شناخته شده است. تهیه این پروتئین به وسیله روش‌های بیوشیمیایی به دلیل آلودگی با پروتئین‌های دیگر سبب محدودیت‌هایی در مطالعات بیشتر بر روی آن شده است. در مطالعه حاضر، ژن کد کننده Omp31 بروسلا ملیتنسیس به درون پلاسمید pET32b(+) وارد شد. صحت پلاسمید ساخته شده با استفاده از آنزیم‌های هضم کننده و سکوئنسیگ تایید گردید. پروتئین Omp31 در باکتری اشریشیا کلی بیان و پروتئین نوترکیب حاصل به روش کروماتوگرافی با استفاده از آگارز متصل به نیکل خالص گردید. الکتروفورز و ایمونوبلاتینگ پروتئین نوترکیب Omp31 را تایید نمود. پروتئین نوترکیب Omp31 تولید شده می‌تواند در مطالعات ایمونولوژیکی و بررسی آن به عنوان کاندید واکسن علیه بروسلا استفاده شود.}, keywords_fa = {پروتئین غشایی خارجی 31,بروسلوز,بروسلا ملیتنسیس,کلونینگ}, url = {https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_58.html}, eprint = {https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_58_e575e3e11c83bd25ac4ee6b4e5868492.pdf} }