@article { author = {Tursunov, K. and Begaliyeva, A. and Ingirbay, B. and Mukanov, K. and Ramanculov, E. and Shustov, A. and Mukantayev, K.}, title = {Cloning and expression of fragment of the rabies virus nucleoprotein gene in Escherichia coli and evaluation of antigenicity of the expression product}, journal = {Iranian Journal of Veterinary Research}, volume = {18}, number = {1}, pages = {36-42}, year = {2017}, publisher = {Shiraz University}, issn = {1728-1997}, eissn = {2252-0589}, doi = {10.22099/ijvr.2017.4028}, abstract = {Rabies virus nucleoprotein (N protein) encapsidates genomic RNA of the virus and forms the viral ribonucleoprotein complex. These N proteins represent highly organized structures which activate proliferation of B cells and production antibodies against the N protein. In addition to the B cell, the rabies virus N protein has been shown to induce potent T helper cell responses resulting in a long-lasting and strong humoral immune response. Rabies virus N protein is a molecular target of choice for development of tools to diagnose acute rabies infection. We produced a recombinant immune reactive C-terminal fragment of the rabies virus N protein which contains an antigenic determinant located between positions 360-389. Synthetic gene encoding the N protein was cloned into an expression plasmid to produce the recombinant antigen in Escherichia coli cells BL21 (DE3). SDS-PAGE showed presence of the product with expected molecular weight (44 kDa). The recombinant fragment of the N protein efficiently recognized antibodies in sera from mice immunized with an inactivated rabies virus. Thus produced recombinant antigen of the rabies virus N protein can be used in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for diagnosis of the rabies infection.}, keywords = {Diagnostics,ELISA,Nucleoprotein,Rabies virus,Recombinant antigen}, title_fa = {کلونینگ و بیان قطعه‌ای از ژن نوکلئوپروتئین ویروس هاری در اشریشیا کولای و ارزیابی آنتی ژنیسیتی محصول بیان}, abstract_fa = {نوکلئوپروتئین ویروس هاری (پروتئین N) RNA ژنومی ویروس را در کپسید محصور کرده و کمپلکس ریبونوکلئوپروتین ویروسی را تشکیل می‌دهد. این نوکلئوپروتیئن‌ها ساختارهای بسیار سازمان یافته‌ای هستند که تکثیر سلول‌های B و تولید آنتی بادی‌های ضد پروتئین N را فعال می‌کنند. علاوه بر سلول B، نوکلئوپروتئین ویروس هاری نشان داده شده است که پاسخ‌های قوی سلول T کمکی را القا می‌کند که منجر به یک پاسخ ایمنی هومورال طولانی مدت و قوی می‌شود. پروتئین N ویروس هاری یک هدف مولکولی انتخابی برای توسعه ابزار تشخیص عفونت حاد هاری است. ما یک قطعه C-terminal نوترکیب واکنشی ایمنی از پروتئین N ویروس هاری تولید کردیم که دارای یک شاخص آنتی ژنیکی واقع در بین موقعیت‌های 360 تا 390 است. ژن سنتزی کد کننده پروتئین N به منظور تولید آنتی ژن نوترکیب در سلول‌های BL21 (DE3) باکتری اشریشیا کولای درون یک پلاسمید بیان کلون شد. SDS-PAGE حضور یک محصول با وزن مولکولی مورد انتظار (kDa 44) را نشان داد. قطعه نوترکیب پروتئین N به طور موثر آنتی بادی‌های موجود در سرم‌های موش‌های ایمن شده با یک ویروس غیر فعال شده هاری را شناسایی کرد. بنابراین، آنتی ژن نوترکیب تولید شده از نوکلئوپروتئین ویروس هاری می‌تواند در سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم برای تشخیص عفونت هاری مورد استفاده قرار گیرد.}, keywords_fa = {تشخیصی,ELISA,نوکلئوپروتئین,ویروس هاری,آنتی ژن نوترکیب}, url = {https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_4028.html}, eprint = {https://ijvr.shirazu.ac.ir/article_4028_709e868fd86c0ed9aa4de8730a87981e.pdf} }